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摘要:本文研究肝X受體(LXR)激動劑對apoE基因敲除小鼠NPC1表達的影響.52只雄性apoE基因敲除小鼠被隨機分成4組:(a)基礎組(baselinegroup,n=10);(b)對照組(controlgroup,n=14);(c)LXR激動劑治療組(treatmentgroup,n=14);(d)LXR激動劑預防組(preventiongroup,n=14).各組小鼠均被給予高脂/高膽固醇飼料喂養;基礎組小鼠被賦形劑灌胃處理8周;對照組小鼠被賦形劑灌胃處理14周;LXR激動劑治療組小鼠在前8周被賦形劑灌胃處理,后6周被T0901317灌胃處理;LXR激動劑預防組小鼠被T0901317灌胃處理14周.采用實時定量PCR,Westernblot和免疫組織化學方法分別檢測組織中NPC1mRNA和蛋白質的表達;采用酶法測定血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)和載脂蛋白B(ApoB)含量.另外,我們采用RNA干擾技術沉默人THP-1巨噬細胞NPC1基因表達,并將細胞誘導成泡沫細胞,檢測T0901317對該細胞膽固醇流出的影響.結果顯示,LXR激動劑治療組和預防組小鼠的血漿TC,TG,HDL-C和ApoA-Ⅰ水平都較對照組明顯增高(P<0.05);LXR激動劑治療組和預防組小鼠的主動脈粥樣硬化斑塊和脂質條紋明顯少于對照組(P<0.05),其中治療組減少了58.3%,預防組減少了64.2%;LXR激動劑治療組和預防組小鼠的小腸組織、肝臟組織和主動脈NPC1表達上調(P<0.05);和正常THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞比較,RNA干擾組膽固醇流出明顯減少,T0901317處理組膽固醇流出明顯增加.總之,LXR激動劑T0901317能減輕高脂高膽固醇飼料喂養的apoE基因敲除小鼠動脈粥樣硬化病變程度并上調肝臟組織、小腸組織和主動脈NPC1的表達,NPC1基因沉默能使細胞膽固醇流出減少.
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